项目名称：维生素E琥珀酸酯抑制人胃癌细胞生长的作用及信号传导途径

完成单位：哈尔滨医科大学

完成人：吴坤、赵艳、夏薇、单毓娟、李红卫、张晓华、鲁玉霞、张海金、赵岚、贾莉、李贵昌

一、项目概况：

自1998年起，项目第一完成人就致力于研究维生素E琥珀酸酯抑制人胃癌细胞生长的作用及信号传导途径。

恶性肿瘤严重地威胁着人类健康，尤其是胃癌在我国全部恶性肿瘤死亡构成比中占重要地位。寻找对胃癌有效的化学预防治疗剂，对降低胃癌的发生率和死亡率具有重要的理论和实践意义。维生素E琥珀酸酯（RRR－α－tocopherylsuccinate，vitamineEsuccinate，VES）是天然维生素E的衍生物，国外一些离体试验结果表明，VES对人乳腺癌、前列腺癌等多种肿瘤细胞生长有抑制作用，但尚未见到有关对胃癌作用的报道。因此，本研究在整体试验条件下以化学致癌物苯并（a）芘［B（a）P］诱导的小鼠前胃癌为模型，离体试验条件下以人胃癌SGC－7901细胞为靶细胞，探讨VES对胃癌细胞的生长抑制作用。在此基础上，探讨VES抗肿瘤作用的信号传导途径及其与维生素E抗肿瘤作用机制的异同点。结果表明VES并不象维生素E那样通过抗氧化作用，而主要是通过诱导肿瘤细胞凋亡和促进细胞分化来抑制肿瘤细胞生长的。为进一步探讨VES的抗肿瘤作用机制，采用RNA干扰（siRNA）、反义寡聚核苷转染、显性失活突变体转染及使用特异性阻断剂等技术，用反证法明确VES诱导胃癌细胞凋亡和促进细胞分化的信号传导途径及各传导因子的上、下游关系。

经大量离体试验及动物整体试验，均证明VES对胃癌细胞生长有明显抑制作用后，通过对临床胃癌组织进行病理学检测，探讨并筛选可用于VES治疗胃癌的效果评价指标。自主合成VES，根据动物和细胞实验结果验证VES合成品对肿瘤细胞的生长抑制作用，为今后VES应用于临床实践奠定理论基础。

二、项目研究结果和结论：

（1）本研究在国内外首次综合采用整体动物试验、离体试验及临床胃癌病理组织学检测相结合的方法，深入探讨了维生素E琥珀酸酯（VES）对胃癌细胞的生长抑制作用及其信号传导途径，并发现VES的作用及机制不同于维生素E。

（2）整体试验研究发现，在B（a）P诱导的小鼠前胃癌模型中，VES可显著降低肿瘤的数量和体积，提高小鼠免疫功能，且腹腔注射效果优于经口灌胃。

（3）VES能够明显抑制人胃癌SGC－7901的生长及DNA合成，其抗肿瘤作用机制不同于维生素E，即不通过抗氧化活性实现，而主要是诱导肿瘤细胞分化和细胞凋亡。VES可通过外源性TGF－β、死亡受体、MAPK信号途径及内源性线粒体信号途径启动SGC－7901细胞凋亡，并通过TGF－β和MAPK途径诱导细胞分化。

（4）在方法学上采用RNA干扰、反义寡聚核苷转染、显性失活突变体转染技术，并使用特异性阻断剂等，用反证法探讨VES诱导SGC－7901细胞凋亡和促进细胞分化的信号传导途径及各因子的上、下游关系。

（5）临床胃癌组织检测发现，Fas和PCNA可作为今后VES临床应用的预后评价指标。自主合成的VES与VES标准品一样具有明显的抑制肿瘤细胞生长作用，为将VES的基础研究成果推广应用起到了促进作用。

本研究将为肿瘤的化学预防治疗开辟一个新的途径，对提高肿瘤患者生存质量将起重要作用。

三、项目推广应用情况：

本项目研究获国家发明专利1项，黑龙江省政府科学技术（自然类）二等奖1项和黑龙江省医药卫生科技进步一等奖1项。发表科研论文37篇，相关综述15篇，其中SCI收录10篇，被SCI源期刊引用111次，并在2部英文专著及1部全国规划教材中涉及本研究内容，多次在国内外学术会议和国家级医学继续教育学习班上进行交流，产生较大的学术影响。在本项目实施过程培养的5名博士研究生和5名硕士研究生均获得学位，促进了人才建设和交流；在实验室建立了转染方法，并建立了小鼠胃癌模型，积累了经验，推动了实验室建设与学科发展。