项目名称：抗病毒人源基因工程抗体的基础和应用研究

项目完成单位：中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所

项目完成人：梁米芳、李德新、曹经瑗、张全福、毕胜利、李川、刘琴芝、

张世珍、李建东、孟庆玲、孙丽娜、刘峰、王世文

项目概况：

项目研究经费来源：国家“十五”重大科技专项；国家“863”计划；国际科技合作重点项目；中弗国际合作项目；国家自然科学基金。

项目研究起止年月：1996年09月至2007年01月

基因工程抗体是一类具有极大应用前景的生物制剂，近年来其开发研究已经取得很大进展并已经由基础研究阶段步入实质性应用研究和开发阶段。目前美国FDA已批准上市24种基因工程抗体药，正在待批中的抗体有50－60种。随着抗体工程平台技术的逐渐完善，当今世界工程抗体的研究和开发趋向将逐渐从人源化基因工程抗体转向纯人源基因工程抗体。

我国基因工程抗体药研究开发方面近年来也具有较大进展，主要集中在抗肿瘤和移植免疫、自身免疫等方面，但至今为止，大多数基因工程抗体药尚未在我国获得新药证书或投放市场，人源基因工程抗体作为一类生物药在我国尚未获成功，尚无任何人源基因工程抗体药在我国获得批准。目前为止，世界上抗病毒抗体生物药类中仅有抗RSV抗体研发成功，且为带有鼠源抗体基因的人源化抗体。而抗病毒基因工程抗体制剂无论是人源化或人源抗体在我国生物制品领域仍然是一个空白。

本项目“抗病毒人源基因工程抗体的基础和应用研究”属于生命科学技术领域中预防医学和生物技术研究领域，针对我国传染病预防控制和突发新发传染病应急需求，以获得可用于预防和治疗用抗病毒人源基因工程抗体药开发的抗病毒功能抗体为研究目标，通过连续十余年的研究，已初步完成具有独立知识产权的抗体工程平台技术以及建立于该平台技术上的多种抗病毒基因工程抗体的研发。本项目主要研究的抗病毒人源基因工程抗体均为原始创新功能性抗体，部分为高亲和力中和抗体，同时项目组拥有自主知识产权的全抗体高效表达载体系统和功能分析系统，目前获得的多种抗病毒基因工程抗体均为国际或国内首创，为纯人源分离的与天然抗体结构相同的基因工程全抗体，完全拥有自主知识产权。

项目研究结果及结论：

本项目主要完成了以下几大方面的研究内容：

1．抗病毒人源基因工程抗体前期平台技术建设，建立了成熟的人源噬菌体抗体库及高效高通量筛选技术。

2．研制成功针对汉坦病毒、甲型肝炎病毒、狂犬病病毒、SARS病毒、禽流感病毒、乙型肝炎病毒、流感病毒、CMV病毒、AAV病毒、戊肝病毒等多种具有不同功能的特异性人源Fab抗体和人源IgG全抗体，并系统分析和鉴定了上述抗体功能活性和抗原结合位点，其中多种功能抗体为高亲和力抗病毒中和抗体，可用于病毒病预防和治疗用人源基因工程抗体制剂的开发。

3．研制出拥有自主知识产权的人源全抗体表达载体系统（重组杆状病毒昆虫细胞系统全抗体表达载体系列和CHO表达载体系列），获得国内外30余个实验室认可和应用。基于CHO细胞高效表达载体基础上的抗甲型肝炎病毒基因工程抗体已获得成果转化，鸡尾酒式抗甲肝病毒人源基因工程抗体制剂已进入中试产品申报研究阶段。

4．利用抗体工程技术完成了多项跨学科研究，实现了在植物中高效表达人源中和抗体并发现抗体糖基化差异的机理；成功的在转基因鼠中表达了抗汉坦病毒G2蛋白的人源化抗体；研究了抗汉坦病毒抗体在细胞内的定位表达。

项目推广应用情况：

项目目前共申请和公开专利10项，获得专利3项，成果转让1项，发表相关论文和论著30余篇，其中SCI论文11篇，培养博硕士研究生10余名，并与美国国立卫生研究院（NIH），美国疾病预防控制中心（CDC），德国海德堡大学等国内外研究结构广泛开展了成果及学术合作交流。本项目研究成果对我国预防和治疗用抗病毒基因工程抗体生物制剂的研发和我国主要传染病的预防和控制工作具有实际意义和良好的应用前景。

本项目获得的抗病毒人源基因工程抗体完全拥有自主知识产权。本项目研究成果为抗病毒人源基因工程抗体药的制备提供了良好的前期基础，上述抗体进入规模生产后，均可获一类新药证书，一旦投放我国市场，将带来客观的经济效益和良好的应用前景。目前的应用情况如下：

1、目前本项目中抗甲肝基因工程抗体两株CHO细胞生产细胞系已转让华北制药集团，正在共同进行产品化研发及获得新药证书。

2、本项目研究开发的重组杆状病毒昆虫细胞和CHO细胞全抗体表达载体系统已获得国内外多家合作单位的兴趣和应用。

3、本项目中获得的抗汉坦病毒、抗甲肝病毒基因工程抗体等已用于多家实验室并建立合作关系。

4、项目中获得的功能抗体已具备进入下游开发产品条件，正在寻求下游合作。